革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,用于区分细菌的染色性质和形态特征。革兰氏染色后,革兰阳性细菌呈紫色或暗紫色,革兰阴性细菌呈红色或粉红色。
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,用于区分细菌的染色性质和形态特征。其基本步骤包括:
1. 准备细菌样本:从培养基上挑选适量的细菌,用无菌技术制备成薄片。
2. 固定细菌:将薄片在火焰中烘烤,使细菌附着于玻璃片上。
3. 染色:在已固定的细菌上滴加革兰氏紫(crystal violet)染色液,静置片刻。
4. 冲洗:用蒸馏水轻轻冲洗片面,使多余的染色剂流走,但注意不要冲洗得过分。
5. 加碘液:滴加碘液(Lugol's iodine)使革兰氏紫形成不溶于水的络合物。
6. 冲洗:用蒸馏水轻轻冲洗片面,使多余的碘液流走。
7. 去色:滴加酒精(草酒精或酒精醇类)使染色液溶解,直到干燥的薄片不再有紫色溶液从上面冒出。
8. 冲洗:用蒸馏水轻轻冲洗片面,使多余的酒精流走。
9. 逆向染色:滴加作为对比染色剂的伊红(safranin)染色液,静置片刻。
10. 冲洗:用蒸馏水轻轻冲洗片面,使多余的染色液流走。
11. 干燥:将染色后的薄片晾干。
12. 观察:在显微镜下观察细菌的形态和染色性质。革兰氏染色后,革兰阳性细菌呈紫色或暗紫色,革兰阴性细菌呈红色或粉红色。